Kronik Hepatit B'nin Aşı veya Aşı-Antikor Kompleksi ile Yüklü pDC ve mDC'ler ile Tedavi Edilmesi

Abstract

Amaç: Yapılan bu çalışmada, aşı veya aşı-antikor kompleksi ile yüklenmiş plazmasitoid dentritik hücre (pDC) ve klasik/miyeloid dentritik hücrelerinin (cDC/mDC) birbirlerine olan sinerjik etkilerinden yararlanarak kronik hepatit B tedavisinde alternatif dentritik hücre (DC) aşısı geliştirilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: HBV transgenik (HBV-tg) farelerin kemik iliği hücreleri, in vitro ortamda, flt-3L varlığında pDC ve mDC’lere farklılaştırılarak aşı veya aşı-antikor kompleksi ile yüklendikten sonra, HBV-tg fareler, iki hafta ara ile iki kez intraperitonel olarak immünize edildi. ELISA yöntemi ile anti-HBsAg yanıtı, RT-qPCR ile plazmadaki HBV DNA’sındaki azalma incelendi. Bulgular: Sekizinci günde yapılan akım sitometri analizinde hücrelerin %65 oranında mDC ve %35 oranında pDC’ye farklılaştığı tespit edildi. DC aşılaması sonucunda HBV-tg farelerde anti-HBsAg yanıt oluşmasına rağmen istatistiksel olarak anlamlı olmadığı tespit edildi. Ayrıca plazmadaki virüs DNA’sında azalma olmadığı belirlendi. Sonuç: Fare kemik iliği hücrelerinden pDC ve mDC elde edilmesine rağmen aşı veya aşı-antikor kompleksinin DC arasındaki sinerjik etkiyi engellediği düşünülmektedir.

Objective: In this study, we aimed to develop new alternative dendritic cell (DC) vaccine by using synergic effect of between vaccine or vaccine-antibody loaded plasmacytoid dendritic cell (pDC) and conventional DC/myeloid DC (cDC/mDC) to treat chronic hepatitis B. Materials and Methods: pDCs and mDCs derived from bone marrow of chronic hepatitis B model (HBV-tg) mice in the presence of flt-3L in in vitro and loaded with vaccine or vaccine-antibody complex and then HBV-tg mice were immunized intraperitoneally two times at two weeks intervals. Anti-HBsAg response was detected by ELISA, decrease of HBV DNA was investigated by RT-qPCR. Results: At day 8, flow cytometry analyses have shown that the frequency of mDCs was about 65% and pDC was about 35%. Anti-HBsAg response was induced in HBV-tg mice but it was not significant statistically and we did not detected decrease of HBV DNA in plasma. Conclusion: Even though pDC and mDC were derived from bone marrows, vaccine or vaccine-antibody complex may protect synergic effect between DCs.