Dermal Fibroblast Hücrelerinde Oleuropeinin Antioksidan Özelliğinin Ve Yaşlanma Üzerine Etkilerinin Araştırılması

Abstract

Amaç: Yapılan çalışmada hidrojen peroksit ile oksidatif stres oluşturulmuş dermal fibroblast hücrelerine farklı dozlarda oleuropein uygulanmış ve oleuropeinin oksidatif strese ve yaşlanma mekanizmasına karşı etkileri incelenmiştir. Gereç ve yöntem: Oleuropeinin dermal fibroblast hücreleri üzerindeki toksik etkisi MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol- 2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) analiziyle belirlenmiştir. Oksidatif stres oluşturulmuş dermal fibrob- last hücrelerinde oleuropeinin total antioksidan kapasite üzerine etkisi total antioksidan durumu inceleme kiti ve total oksidan kapasite üzerine etkisi, total oksidan durumu inceleme kiti ile belirlenmiştir. Senesensin (yaş- lanmanın) test edilmesinde standart protokollerde yer alan SA-ß-gal (senescence associated ß-galaktosidase) aktivitesi hücrelere verilen X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galacto-pyranoside) substratının parça- lanması yöntemi ile ölçülmüştür. Bulgular: Oleuropeinin toksik doz düzeyi 750 ?M olarak saptanmıştır. BJ Fibroblast hücrelerinde 24 saat süre ile H2O2 ile inkübasyonundan kaynaklanan total oksidan durumunda istatistiksel olarak anlamlı olmayan bir azalma gözlemlenmiştir (p>0,05). Oleuropein ile muamele edilen BJ Fibroblast hücre gruplarında 24 saat süre ile H2O2 ile muamele edilen BJ Fibroblast hücre gruplarına göre total antioksidan durumunda istatistiksel olarak anlamlı bir artış gözlemlenmiştir (p<0,05). H2O2 ile oksidatif stres oluşturulduktan sonra oleuropein ile muamele edilen hücre gruplarında yaşlanma etkilerinin daha az ortaya çıktığı SA-ß-gal boyama ile tespit edilmiştir. Sonuç: Oleuropeinin fibroblast hücrelerinde antioksidan enzim aktivitesini arttırdığı ve buna bağlı olarak oksi- datif stres koşullarında hücrelerde meydana gelen yaşlanma mekanizmalarını azalttığı gözlemlenmiştir

Aim: In the study, oleuropein was administered to dermal fibroblast cells oxidatively stressed with hydrogen peroxide at different doses and the effects of oleuropein on oxidative stress and aging mechanism were investigated. Materıal Method: The toxic effect of oleuropein on dermal fibroblast cells was determined by MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) analysis. The effect of oleuropein on total antioxidant capacity in oxidative stressed dermal fibroblast cells was evaluated with total antioxidant status determination kit and the effect of oleuropein on total oxidant capacity in oxidative stressed dermal fibroblast cells was evaluated with total oxidant status determination kit. SA-ß-gal (senescence associated ß-galactosidase) activity, which is included in standard protocols when senescence is tested, was measured by the method of disruption of the X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galacto-pyranoside) substrate given to the cells. Results: The toxic dose level of oleuropein was determined as 750 ?M. A statistically insignificant reduction in the total oxidant status from incubation with H2O2 for 24 hours was observed in BJ Fibroblast cell line (p>0,05). A statistically significant increase in the total antioxidant status was observed in oleuropein treated BJ fibroblast cell groups compared to BJ Fibroblast cell groups treated with H2O2 for 24 hours (p<0,05). After oxidative stress formation with H2O2, the aging effects in the oleuropein-treated cell groups were less marked by SA-ß-gal staining. Conclusion: It has been observed that oleuropein increases the activity of antioxidant enzymes in fibroblast cells and consequently reduces aging mechanisms in cells under oxidative stress conditions.