İKİ FARKLI MEME KANSERİ HÜCRE HATTINDA FLORESAN İŞARETLİ MAACKİA AMURENSİS-LEKTİN-1 VE WHEAT GERM AGLUTİN’İN HÜCRE YÜZEY GLİKAN PROFİLLERİNDEKİ FARKLI ETKİLER

Abstract

Amaç: Meme kanseri teşhisinde patolojik tetkikler gibi birçok yöntem kullanılmaktadır. Tüm bu tetkiklerin ve yöntemlerin yanı sıra, kanser araştırmalarında glikobiyolojinin de önemi oldukça artmıştır. ER (+) özellik gösteren MCF-7 ve ER (-) özellik gösteren MDAMB-231 meme kanseri hücre hatlarının zar yüzeylerinde görülen şeker rezidüleri miktar farklılıkları FITC-(Maackia Amurensis-Lektin-1) Ve FITC-(Wheat Germ Aglutin) ile spesifik olarak işaretlenmiş ve ışıma yoğunluğu göreceli olarak irdelenmiştir. Bu yöntem ile meme kanseri hücre soylarının membranlarında bulunan sialik asit birimlerindeki farklılıkları iki saat gibi kısa bir zamanda, hassas olarak ayrılabildiğinin açıkça ortaya çıkarılması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Çalışmamızda MCF-7 ve MDA-MB-231 hücre soyları kullanılmıştır. Çalışmada kullanılması planlanan floresan işaretli lektinler [FITC-(Maackia Amurensis-Lektin-1) Ve FITC-(Wheat Germ Aglutin)] ilgili firmalardan satın alınmış ve kullanım protokolüne uygun olarak hazırlanıp işaretlemeler yapılmıştır. Bulgular: MCF-7 ve MDA-MB-231 meme kanseri hücre hatlarına FITC işaretli Maackia amurensis lektini-1 uygulanmıştır. Buna göre; MDA-MB-231 hücre hattı MCF-7’a göre göreceli olarak daha yoğun bir ışıma göstermiştir. Aynı kanser hücre hatlarına FITC işaretli Wheat Germ Aglutinin uygulanmıştır. Bu işaretleme sonucunda da her iki kanser hattında da benzer yoğunlukta ışıma tespit edilmiştir. Sonuç: Çalışmada kullanılan MCF-7 ve MDA-MB-231 hücre hat arının membranların da görülen bu farklılıklar önemli bulunmuştur. Hücrelere uygulanan iki saatlik boyama yöntemi ile iki farklı meme kanseri hücre tipi hızlı bir şekilde ayrılmıştır. Aynı zamanda immmünofloresan işaretli lektinler yardımıyla, glikokonjugatların, hızlı ve özgün ayrımda kullanılabilirliği gösterilmiştir.

Objective: Many methods such as pathological examinations are used to diagnose breast cancer. In addition to all these tests and methods, the use of glycobiology has also increased significantly in cancer research. Differences in sugar residues observed on the membrane surfaces of breast cancer cell lines ER (+) -creating MCF-7 and ER (-) MDA-MB-231 were specifically marked with FITC-(Maackia Amurensis-Lectin-1) Ve FITC-(Wheat Germ Aglutinin) The intensity of radiation is discussed relatively. The aim of using this method is to clearly reveal that the differences in the sialic acid units in the membranes of breast cancer cell lines can be precisely separated in as little as two hours. Material and Method: MCF-7 and MDA-MB-231 ) cells were used in our study. [FITC-(Maackia Amurensis-Lectin-1) Ve FITC- (Wheat Germ Aglutin)] were purchased from the respective companies. Following this step, the FITC marked products were prepared and marked according to usage protocols. Results: FITC-labeled Maackia amurensis Lectin-1 was applied to MCF-7 and MDA-MB-231 breast cancer cell lines. Subsequently, the MDA-MB-231 cell line showed a relatively more intense radiation than the MCF-7. The FITC marked Wheat germ agglutinin was applied to the same cancer cell lines. As a result of this marking, radiation of similar intensity was detected in both cancer lines. Conclusion: These differences seen in the membranes of the MCF-7 and MDA-MB-231 cell lines used in the study are significant. Two different types of breast cancer cell types were rapidly separated using the two hour staining method applied to the cells. At the same time, with the help of immunofluorescent-labeled lectins, the availability of glyconoconjugates was demonstrated for rapid and specific discrimination.